2010 年7月，一則“乳制品致嬰兒性早熟”的新聞報(bào)道引起了社會(huì)廣泛的關(guān)注。這是至08 年“三鹿奶粉”事件之后，又一起有關(guān)乳制品食品安全事件。事件一出，農(nóng)業(yè)部立即出臺(tái)檢測(cè)方法，對(duì)相關(guān)奶粉中的激素進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為：該乳品中激素含量水平均在國(guó)家限定范圍內(nèi)。此次事件中人們對(duì)嬰兒食用奶粉中的雌激素和孕激素水平是否超標(biāo)的問(wèn)題引起了廣泛的討論，同時(shí)對(duì)激素類(lèi)物質(zhì)檢測(cè)的相關(guān)指標(biāo)提出了更高的要求。曾有專(zhuān)家指出目前在我國(guó)還沒(méi)有專(zhuān)門(mén)針對(duì)奶粉中激素檢測(cè)的專(zhuān)門(mén)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，所采用的是動(dòng)物性食品中激素檢測(cè)方法。針對(duì)這一問(wèn)題，沃特世推出了UPLC®-XevoTM TQ 質(zhì)譜系統(tǒng)，專(zhuān)門(mén)針對(duì)奶粉中雌激素和孕激素物質(zhì)進(jìn)行快速檢測(cè)與定量分析。 

沃特世UPLC-Xevo TQ 系統(tǒng)對(duì)奶粉中性激素快速檢測(cè)的原理 
首先利用UPLC （超液相色譜）的超分離能力實(shí)現(xiàn)對(duì)被檢測(cè)的奶粉的有效分離，并采用Xevo TQ 的InliStartTM 功能快速方便建立質(zhì)譜，PICS （子離子確認(rèn)掃描）功能輔助定性，以及應(yīng)用Quanpedia （方法庫(kù)）自動(dòng)導(dǎo)入和導(dǎo)出生成MRM 方法及液相方法，zui后通過(guò)利用UPLC/Xevo TQ 的正負(fù)電離模式快速切換功能,實(shí)現(xiàn)一次進(jìn)樣，同時(shí)檢測(cè)多種激素（7種雌激素，6種孕激素），明顯縮短檢測(cè)周期,提高檢測(cè)通量。 

分析條件與步驟 
本試驗(yàn)適用于分析外源性激素類(lèi)物質(zhì)，如果分析內(nèi)源性物質(zhì)可對(duì)檢測(cè)樣品進(jìn)行酶解，酶解后的處理方法相同。 
樣品前處理 
■ 稱(chēng)取1g 奶粉樣品于8ml 水中，充分混勻，超聲5min 
■ 在混勻液中加入1ml 冰醋酸，酸化后再添加16ml 乙腈進(jìn)一步沉淀水溶性蛋白。7500rpm 離心10min ，取上清液于氮?dú)饬飨麓抵烈译婧?lt;5% 
■ 分別用6ml 甲醇、6ml 水活化平衡Oasis HLB（200mg/6cc） 小柱 
■ 上樣，流速控制在3-4ml/min 
■ 清洗：分別用6ml 酸洗（5% 甲醇、2% 冰醋酸）、6ml 堿洗（5% 甲醇、2% 氨水）、6ml 甲醇水溶液（10% 甲醇）進(jìn)行清洗 
■ 將清洗后的Oasis HLB 小柱抽干10min 
■ 乙酸乙酯/甲醇（9/1 v/v ）活化氨基小柱（Sep-pak NH2 500mg/6cc ），活化平衡后與Oasis HLB 柱串聯(lián) 
■ 洗脫: 分別用6ml 乙酸乙酯/甲醇（9/1 v/v ）、6ml5% 氨水甲醇溶液洗脫串聯(lián)后的兩根柱子，收集洗脫液 
■ 氮?dú)饬飨麓蹈上疵撘褐?.2ml 
■ 依次加入0.4ml 乙腈、0.4ml 水溶液，分別渦旋，使zui終體積為1ml ，其中乙腈與水的比例為1:1 
■ 7000rpm 離心10min 或過(guò)膜，收集上清液于UPLC/MS/MS 分析 

LC 條件 
LC 系統(tǒng)：ACQUITY UPLC®系統(tǒng) 
色譜柱：ACQUITY UPLC HSS T3，2.1×50mm，1.8µm 
柱溫：40℃ 
樣品室溫度：10℃ 
流速：0.6mL/min 
流動(dòng)相A： 乙腈 
流動(dòng)相B：水 
梯度： 


弱洗針溶液：10% 乙腈水溶液 
強(qiáng)洗針溶液：90% 乙腈水溶 
總運(yùn)行時(shí)間：6min 
進(jìn)樣體積：5µL ，不充滿定量環(huán)（針溢出） 
MS 條件 
MS 系統(tǒng)：Xevo TQ MS 
電離模式：ESI+/ESI 
¬噴霧電壓：3.2kv（ESI+）/2.8kv（ESI-） 
脫溶劑氣：氮?dú)猓?000L/Hr，450℃ 
錐孔氣：氮?dú)猓?0L/Hr 
源溫度：150℃ 
采集模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM） 其他質(zhì)譜參數(shù)： 

數(shù)據(jù)采集與處理 
本試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)為Waters® MassLynxTM 4.1 SCN729，質(zhì)譜方法開(kāi)發(fā)用此軟件的InliStart功能，不需要有經(jīng)驗(yàn)的質(zhì)譜操作人員進(jìn)行方法開(kāi)發(fā)與優(yōu)化，同時(shí)配合TargetLynx®軟件，只需設(shè)置幾個(gè)參數(shù)即可得到完整的報(bào)告。InliStart功能可同時(shí)開(kāi)發(fā)正負(fù)離子質(zhì)譜參數(shù)，并實(shí)現(xiàn)一次進(jìn)樣正負(fù)離子同時(shí)掃描